談?wù)動(dòng)绊懣偟桶钡獪?zhǔn)確性的因素

　　環(huán)境水體中存在多種形式的含氮化合物，它們由于化學(xué)和生化作用而不斷變化和循環(huán)。各種含氮化合物，包括有機(jī)氮化合物和無(wú)機(jī)氮化合物，在水體中往往通過(guò)降解、分解、氧化等復(fù)雜過(guò)程發(fā)生變化，最終變成硝酸鹽。因此，分析測(cè)定各種形態(tài)氮的含量，不僅是了解水體污染情況的必要條件，而且在環(huán)境化學(xué)和環(huán)境醫(yī)學(xué)中也具有重要意義。

　　總氮的定義是水中各種形式的無(wú)機(jī)和有機(jī)氮的總量，包括NO3-、NO2-、NH4+等無(wú)機(jī)氮和蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)胺等有機(jī)氮，以氮的毫克數(shù)表示每升水計(jì)算。氨氮是指水中以游離氨（NH3）和銨離子（NH4+）形式存在的氮。兩者都經(jīng)常用來(lái)表示水體被營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)污染的程度。影響兩種結(jié)果準(zhǔn)確性的因素：

　　1、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境因素

　　總氮和氨氮的分析應(yīng)在無(wú)氨的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行，環(huán)境中不得含有石油和其他氮化合物，不得在分析氨氮等氮項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行總氮分析。所用試劑和玻璃器皿也應(yīng)分開(kāi)存放，并保持干燥、清潔，避免交叉污染。

　　2、樣品保存時(shí)間和溫度因素

　　由于樣品中的氮化合物是不斷變化的，所以水樣采集后應(yīng)立即檢測(cè)或放入冰箱在低于4℃的條件下保存，但不超過(guò)24h。若長(zhǎng)期存放，可在1000ml水樣中加入0.5ml硫酸（1.84g/ml），酸化pH小于2，應(yīng)盡快進(jìn)行測(cè)定。在樣本采集過(guò)程中，應(yīng)考慮與外界空氣交叉污染的可能性，做到與外界空氣交叉污染的可能性，取樣后應(yīng)及時(shí)封存。避免光線引起的溫度變化和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部環(huán)境引起的誤差。

　　3、試劑和制備方法的選擇因素

　　任何溶液的制備都離不開(kāi)水這一介質(zhì)。首先是制備無(wú)氨水，因?yàn)樵谥苽錈o(wú)氨水的過(guò)程中，空氣中的氨或銨鹽難免溶于水，污染試劑水。這種環(huán)境會(huì)給試劑空白帶來(lái)難以消除的錯(cuò)誤。特別是會(huì)增加總氮的試劑空白，使總氮的檢測(cè)值小于實(shí)際值。因此，配制無(wú)氨純水時(shí)，一定要妥善保存，要盡快配制。由于總氮的測(cè)定依據(jù)《堿性過(guò)硫酸鉀消解紫外分光光度法》（GB11894-89），該方法雖然步驟比較簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備要求不高，但對(duì)空白試驗(yàn)的吸光度有嚴(yán)格要求，影響空白的主要因素是過(guò)硫酸鉀的質(zhì)量。在制備堿性過(guò)硫酸鉀溶液的過(guò)程中，建議先制備氫氧化鈉溶液，再制備過(guò)硫酸鉀溶液。由于過(guò)硫酸鉀溶解很慢，可用水浴加熱，加熱溫度控制在55～60℃之間。當(dāng)過(guò)硫酸鉀溶液完全溶解并冷卻至室溫時(shí)，將其緩慢加入氫氧化鈉溶液中。同時(shí)攪拌，防止氫氧化鈉放熱導(dǎo)致溶液溫度過(guò)高導(dǎo)致過(guò)硫酸鉀局部失效。當(dāng)過(guò)硫酸鉀試劑質(zhì)量不合格時(shí)，會(huì)導(dǎo)致空白值偏高，甚至嚴(yán)重影響樣品結(jié)果。因此，配制堿性過(guò)硫酸鉀溶液時(shí)，水浴溫度應(yīng)盡量控制在50～60℃之間，否則過(guò)硫酸鉀會(huì)分解導(dǎo)致失效，影響結(jié)果。

　　4、水樣色度和濁度的影響

　　由于水樣未經(jīng)處理或混凝沉淀，氨氮結(jié)果偏大，色度和渾濁度高溫消解40min后，發(fā)現(xiàn)比色管底部有白色沉淀，水樣無(wú)色透明，消除了對(duì)總氮結(jié)果的影響。因此，在氨氮的檢測(cè)中，如果混凝沉淀不能去除色度和沉淀，則采用蒸餾法進(jìn)行沉淀，可以更好地消除大氨氮對(duì)結(jié)果的影響。

　　5、消解、比色時(shí)間因素

　　由于“奈斯勒試劑分光光度法”測(cè)定氨氮的過(guò)程中沒(méi)有繁瑣的步驟，只需要10min的顯色時(shí)間，在檢測(cè)期間幾乎沒(méi)有氨氮的損失，而且在總的檢測(cè)過(guò)程中氮，分解后的原子氧在120℃～124℃消解30min，可將水樣中含氮化合物的氮元素轉(zhuǎn)化為硝酸鹽，根據(jù)220nm和275nm波長(zhǎng)處的吸光度計(jì)算總氮含量.但由于壓力鍋內(nèi)的溫度、試劑等問(wèn)題，過(guò)硫酸鉀往往沒(méi)有很好地消解，比色管的地塞沒(méi)有牢固關(guān)閉，導(dǎo)致氨氣揮發(fā)，樣品在蒸煮過(guò)程中蒸發(fā)。消解過(guò)程中，導(dǎo)致后續(xù)在標(biāo)線處加入純水，而樣品體積總氮含量的增加會(huì)導(dǎo)致總氮小于或等于氨氮。

　　6、鉀、鈉、酒石酸銨含量高的影響

　　制備氨氮所需藥物時(shí)，應(yīng)注意鉀、鈉、酒石酸銨含量高時(shí)，氨氮含量會(huì)偏大，結(jié)果大于總氮。酒石酸鉀鈉僅加熱煮沸并不能完全除去氨，應(yīng)加入少量氫氧化鈉溶液煮沸，使溶液體積的25%左右蒸發(fā)。銨鹽使結(jié)果更準(zhǔn)確。